　　大多數三級安全柜的設計允許全天24小時工作。連續工作有助于控制實驗室中灰塵和顆粒的水平。向房間中排風或通過套管接口與專門的排風管相連接的一級A1和A2型生物安全柜，在不使用時是可以關閉的。其他如二級B1和二級B2型生物安全柜，是通過硬管安裝的，就必須始終保持空氣流動以維持房間空氣的平衡。
　　三級安全柜在開始工作以前以及完成工作以后，應至少讓安全柜工作5分鐘來完成"凈化"的過程，應即應留在將污染的空氣派出安全柜的時間。三級安全柜的所有維修工作應該由有資質的專業人員來進行。在三級安全柜操作中出現的任何故障都應該報告，并應在再次使用之前進行維修，每次實驗結束后應對工作室進行清洗和消毒。
　　三級安全柜的維護工作：
　　1.預過濾器一旦受損，應及時更換。
　　2.空氣過濾器有一定的使用壽命，隨著使用期的延長，細菌和塵埃積聚在過濾器上，會導致空氣過濾器壓力損失的增大。空氣過濾器的使用壽命到期后，應立即更換。由于過濾器可能帶有污染物，操作時應注意安全防護，請專業人員來更換。
　　3.有下列情況時，應對三級安全柜進行現場檢測：
　　·生物安全實驗室竣工后，投入使用前，生物安全柜已安裝完畢；
　　·生物安全柜被移動位置；
　　·對生物安全柜進行檢修；
　　·生物安全柜更換過濾器后；
　　·生物安全柜一年一度的常規檢測。

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